چکیده:
زﻣﯿﻨﻪ و ﻫﺪف: ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎ ﻣﯿﮑﺮوارﮔﺎﻧﯿﺴﻢﻫﺎﯾﯽ ﻫﺴﺘﻨﺪ ﮐﻪ در ﺗﻤﺎم ﭘﻬﻨﻪﻫﺎی آﺑﯽ ﯾﺎﻓﺖ ﻣﯽﺷﻮﻧﺪ و ﺑﺮﺧﯽ از آﻧﻬﺎ ﺑﺎ ﺷﮑﻮﻓﺎﯾﯽ ﺗﺤﺖ ﺷﺮاﯾﻂ ﺧﺎص ﻣﺎﻧﻨﺪ درﺟﻪ ﺣﺮارت آب و ﯾﻮﺗﺮوف ﺑﻮدن ﭘﻬﻨﻪ آﺑﯽ در ﭘﺪﯾﺪه ﮐﺸﻨﺪ ﻗﺮﻣﺰ در اﮐﻮﺳﯿﺴﺘﻢ ﻫﺎی درﯾﺎﯾﯽ دﺧﺎﻟﺖ داﺷﺘﻪ ﮐﻪ از اﯾﻦ ﻣﯿﺎن ﺗﻌﺪادی ﺳﻤﯽ ﺑﻮده و ﺗﻌﺎدل اﮐﻮﺳﯿﺴﺘﻢ را ﺑﻪ ﻣﺨﺎﻃﺮه ﻣﯽ اﻧﺪازﻧﺪ. ﯾﮑﯽ از ﺳﻤﻮم ﻣﻬﻢ ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮی ﻫﺎ ﮐﻪ ﺑﺮ ﺳﯿﺴﺘﻢ ﻋﺼﺒﯽ و دﺳﺘﮕﺎه ﺗﻨﻔﺴﯽ ﺗﺎﺛﯿﺮ ﻣﯿﮕﺬارد، ﺳﺎﮐﺴﯽ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ ﻣﯿﺒﺎﺷﺪ. ﻫﺪف از اﯾﻦ ﭘﮋوﻫﺶ، ﺗﺸﺨﯿﺺ ﺳﺮﯾﻊ ﻣﻠﮑﻮﻟﯽ ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﻟﺪ ﺳﻢ ﺳﺎﮐﺴﯽ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ در ﻫﺮﻣﺰﮔﺎن-ﺧﻠﯿﺞ ﻓﺎرس ﺑﺎ روش PCR ﺑﻮده اﺳﺖ.
روش ﺗﺤﻘﯿﻖ: در اواﯾﻞ ﻓﺼﻞ ﭘﺎﯾﯿﺰ ﺳﺎل 1392 در 20 اﯾﺴﺘﮕﺎه واﻗﻊ در ﺳﻪ ﻧﺎﺣﯿﻪ ﻣﺎﻧﮕﺮو) ﺧﻮر ﺗﯿﺎب (، ﻣﺮﺟﺎﻧﯽ) ﺟﺰﯾﺮه ﻻرک و ﻣﻨﻄﻘﻪ ﺣﺪ واﺳﻂ ﺑﻪ دو ﺻﻮرت ﻓﯿﮑﺲ ﺷﺪه) ﺑﺎ ﻓﺮﻣﺎﻟﯿﻦ 2 درﺻﺪ (و ﻓﯿﮑﺲ ﻧﺸﺪه) اﻧﺘﻘﺎل روی ﯾﺦ (ﻧﻤﻮﻧﻪ ﮔﯿﺮی ﺑﻌﻤﻞ آﻣﺪ. ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﺑﻼﻓﺎﺻﻠﻪ در ﺷﺮاﯾﻂ ﺳﺮد ﺑﻪ ﻻﺑﺮاﺗﻮار ﻣﻨﺘﻘﻞ و ﺑﻪ روش DNG ﺗﻐﯿﯿﺮﯾﺎﻓﺘﻪ، DNA اﺳﺘﺨﺮاج ﮔﺮدﯾﺪ. ﺗﺴﺖ PCR ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از DNA ﺳﻮش اﺳﺘﺎﻧﺪارد ﺗﻮﮐﺴﻮژن Anabeana circinalis AWQC131C اﭘﺘﯿﻤﺎﯾﺰ ﮔﺮدﯾﺪ و ﺳﭙﺲ از ﺟﻬﺖ وﯾﮋﮔﯽ و ﺣﺴﺎﺳﯿﺖ ﺑﺮرﺳﯽ ﺷﺪ. آﻣﭙﯿﻠﯿﮑﻮن ﺑﻪ روش T/A Cloningدر ﭘﻼﺳﻤﯿﺪ PTZ57R ﺑﻪ ﺟﻬﺖ ﺗﻮاﻟﯽ و ﺗﻬﯿﻪ ﮐﻨﺘﺮل ﻣﺜﺒﺖ، ﮐﻠﻮن ﮔﺮدﯾﺪ.
ﯾﺎﻓﺘﻪﻫﺎ: ﺗﺴﺖ PCR اﭘﺘﯿﻤﺎﯾﺰ ﺷﺪه و ﻣﺤﺼﻮل 602bp ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﺳﻮش اﺳﺘﺎﻧﺪارد ﺗﮑﺜﯿﺮ ﮔﺮدﯾﺪ. آﻣﭙﯿﻠﯿﮑﻮن ﮐﻠﻮن و ﭘﻼﺳﻤﯿﺪ pSASXT ﺳﺎﺧﺘﻪ ﺷﺪ و ﺳﮑﺎﻧﺲ ژن ﺗﻌﯿﯿﻦ ﮔﺮدﯾﺪ. در ﺑﺮرﺳﯽ وﯾﮋﮔﯽ، ﺑﺎ ﻫﯿﭻ ﯾﮏ از DNA ﻫﺎی ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎ ی - tox و ﺳﺎﯾﺮ ارﮔﺎﻧﯿﺴﻢ ﻫﺎ ﻣﺤﺼﻮﻟﯽ ﺗﮑﺜﯿﺮ ﻧﮕﺮدﯾﺪ. ﻋﻼوه ﺑﺮ آن ﺣﺴﺎﺳﯿﺖ در ﺣﺪ 10 ﮐﭙﯽ از ژﻧﻮم ﺗﺎﯾﯿﺪ ﺷﺪ. ﺑﺮ اﯾﻦ اﺳﺎس از 20 اﯾﺴﺘﮕﺎه ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮداری، در 9 اﯾﺴﺘﮕﺎه)% 45 (، ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﻟﺪ ﺳﻢ) ﺑﻄﻮر ﺑﺎﻟﻘﻮه (ﻣﺸﺎﻫﺪه ﮔﺮدﯾﺪ. ﻫﻤﭽﻨﯿﻦ روش ﻫﺎی ﻣﻮﻟﮑﻮﻟﯽ ﻣﺎﻧﻨﺪ PCR در اﯾﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﭘﺮاﯾﻤﺮﻫﺎی Universal و اﺧﺘﺼﺎﺻﯽ، ﺗﮑﻨﯿﮏ ﻣﻨﺎﺳﺒﯽ ﺑﻪ ﺟﻬﺖ ارزﯾﺎﺑﯽ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﻟﺪ ﺳﻢ ﺳﺎﮐﺴﯽ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ در ﭘﻬﻨﻪ ﻫﺎی ﻣﺨﺘﻠﻒ آﺑﯽ ﻣﯽ ﺑﺎﺷﺪ. ﺑﻌﻼوه در اﯾﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﭘﺎراﻣﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮرﻓﻮﻟﻮژﯾﮏ ﺑﺎ ﮐﻠﯿﺪ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ روش ﻣﯿﮑﺮوﺳﮑﻮﭘﯽ ﺑﻪ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﺟﻮد در اﯾﺴﺘﮕﺎﻫﻬﺎی ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮداری ﺷﺪه ﭘﺮداﺧﺘﻪ ﺷﺪه اﺳﺖ. ﻧﺘﺎﯾﺞ ﺣﺎﺻﻞ ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ درﺗﻤﺎﻣﯽ اﯾﺴﺘﮕﺎﻫﻬﺎ ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮی ﻫﺎ ﺣﻀﻮر داﺷﺘﻪ اﺳﺖ.
ﻧﺘﯿﺠﻪﮔﯿﺮی: ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻣﻮﻗﻌﯿﺖ اﯾﺴﺘﮕﺎﻫﻬﺎﯾﯽ ﮐﻪ ﺗﺴﺖ PCR در آﻧﻬﺎ، ﺣﻀﻮر ژن ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﻟﺪ ﺳﻢ ﺳﺎﮐﺴﯽ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ را ﺗﺎﯾﯿﺪ ﮐﺮده اﺳﺖ، ﻣﯿﺘﻮان ﻧﺘﯿﺠﻪ ﮔﯿﺮی ﻧﻤﻮد ﮐﻪ ﻧﻮاﺣﯽ ﺧﻮرﻫﺎاز ﺟﻤﻠﻪ ﺧﻮرﻫﺎی ﺗﯿﺎب، دارﺳﺮخ و ﺟﻼﺑﯽ، ﺣﺎوی ﺳﯿﺎﻧﻮﺑﺎﮐﺘﺮﻫﺎی ﻣﻮﻟﺪ ﺳﻢ ﺳﺎﮐﺴﯽ ﺗﻮﮐﺴﯿﻦ ﻣﯽ ﺑﺎﺷﻨﺪ.
خلاصه ماشینی:
جدول زیر بیانگر سیانوباکترهای مشاهده شده در ٢٠ ایستگاه نمونه برداری شده است : جدول ١- سیانوباکترهای شناسایی شده در خلیج فارس - ١٣٩٢ نمونه ای از سیانوباکترهای مشاهده شده در زیر نشان داده شده است ایستگاه ها 1234567891011121314151617181920 سیانوباکترها (جنس ) Aphanizomenon * * * * * * * * * * * * * * Aphanocapsa * * * * * * * * * * Aphanothece * * * Anabeana * * * * Anabenopsis * * * chroococcus * * Cyanarcus * * Dactytococcopsis * * * * * Gelio capsa * * * * * * * * * * * * * * * Gelio theca * * * * * * * * * * * * * * * Gamphosphaeria * Halopedia * * Leptothrix * * Lyngbya * Microcystis * * * * * * * * * * * * * * * * * * Merismopedia * Nostoc * * Oscillatoria * * * * * * * * * * * * * * * * * Pediochloris * Phormidium * Raphidiopsis * Rivolaria * * * * * * * * * * * * * * Romeria * * * * Rhabdoderma * * * 16 / / شکل شماره ١: Oscillatoria شکل شماره ٢ : Microcystis / / شکل شماره ٣ : Merismopedia شکل شماره ٤ : Gamphosphaeria نتیجه گیری در پژوهش حاضر، حضور یا عدم حضور سیانوباکترهای مولد سم ساکسی توکسین در ٢٠ ایستگاه در منطقه هرمزگان در فصل پاییز سال ١٣٩٢ با استفاده از روش ملکولی PCR سنجش گردید.